itraq定量蛋白组学
iTRAQ定量蛋白组学:体外同位素标签技术的蛋白质组相对与绝对定量探索
在生命科学的深入研究领域,iTRAQ定量蛋白组学技术崭露头角。这一技术由全球领先的AB Sciex公司研发,以其独特的体外多肽标记定量技术引领潮流。iTRAQ(Isobaric Tag for Relative and Absolute Quantitation)技术,是一种基于体外等质量同位素标签的蛋白质组相对和绝对定量技术。
该技术巧妙地运用了同位素试剂对酶解后的肽段进行标记。通过4至10种不同的同位素试剂,对氨基酸的N-末端及赖氨酸侧链基团进行精确标记。这些标记基团拥有相同的相对分子质量,能够在液相过程中与多肽一同洗脱,随后进入串联质谱进行碎裂分析。样本中的不同混合物在经过iTRAQ标签处理后,肽段携带着这些特有的标签进入质谱分析。这些标签在肽段碎裂时释放特定的质谱报告基团,根据这些报告基团的信号强度,研究人员可以准确地判断样本中蛋白质的相对丰度。
iTRAQ定量蛋白组学的技术流程集蛋白质酶解、iTRAQ标签标记、样品混合以及LC-MS/MS质谱检测与分析等步骤于一体。其高效、灵敏、通用及拓展性强的特点,使其适用于组织、细胞、血液等多种样本的分析。在生物学研究和医学研究中,该技术广泛应用于机理和调控机制研究、动态过程机制探索、疾病标志物的筛选以及药物作用靶点的精准研究等领域。
值得一提的是,iTRAQ定量蛋白组学技术还可以与肽段修饰分析相结合,更深入地研究蛋白质翻译后的修饰变化。这对于理解蛋白质的功能及其调控机制具有极其重要的意义。这一技术的出现为生物学和医学研究者们提供了一把强大的工具,为科研领域的发展注入了新的活力。该技术凭借其无与伦比的精确度和深度,必将在生命科学的研究中扮演越来越重要的角色。